納米抗體制備由重鏈可變區(qū)組成，無(wú)輕鏈和復(fù)雜的恒定區(qū)結(jié)構(gòu)，易于通過基因工程進(jìn)行改造和表達(dá)，可在原核和真核細(xì)胞中低成本大規(guī)模生產(chǎn)；耐高溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等致變性條件，有利于在不同環(huán)境下保持活性，便于儲(chǔ)存和運(yùn)輸。
 

　　其CDR3環(huán)通常更長(zhǎng)，可有效彌補(bǔ)因缺失輕鏈造成的結(jié)合界面損失，能更緊密地結(jié)合抗原，且不含有多余冗雜結(jié)構(gòu)，僅保留了最關(guān)鍵的抗原結(jié)合活性部位，并被保守的框架區(qū)包圍，形成獨(dú)特的凸?fàn)罨蚩诖鼱羁涨唬瑥亩哂懈哂H和力；由于其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，更容易進(jìn)行人源化改造，降低免疫原性，提高其在人體中的安全性和有效性。
 

　　納米抗體制備的步驟：
 

　　-動(dòng)物免疫：選擇健康的羊駝或駱駝等合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，通常選年輕且免疫系統(tǒng)完好的個(gè)體。在實(shí)驗(yàn)前對(duì)其進(jìn)行健康評(píng)估，包括體溫、體重、血液學(xué)和生化指標(biāo)檢測(cè)等。將目標(biāo)抗原免疫到動(dòng)物體內(nèi)，激發(fā)其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生對(duì)目標(biāo)抗原特異性的天然抗體。
 

　　-獲取抗體基因：從免疫后的動(dòng)物外周血B淋巴細(xì)胞中提取RNA，反轉(zhuǎn)錄獲取cDNA，以cDNA為底物PCR擴(kuò)增獲取多樣化納米抗體基因片段。
 

　　-構(gòu)建噬菌體庫(kù)：將多樣化納米抗體基因片段連接到噬菌粒上，構(gòu)建噬菌體庫(kù)。
 

　　-篩選與驗(yàn)證：通過噬菌體展示和篩選技術(shù)從抗體庫(kù)中篩選得到適合的候選納米抗體，并對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證。
 

　　-表達(dá)與純化：選擇合適的表達(dá)系統(tǒng)，如原核表達(dá)系統(tǒng)中的大腸桿菌，或哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中的CHO細(xì)胞、HEK293細(xì)胞等，將表達(dá)載體導(dǎo)入相應(yīng)的細(xì)胞中進(jìn)行納米抗體的表達(dá)。之后采用親和純化、尺寸排阻等方法對(duì)表達(dá)的納米抗體進(jìn)行純化。