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技術文章

TECHNICAL ARTICLES

當前位置:首頁技術文章技術服務 配體模擬激活性抗體制備

技術服務 配體模擬激活性抗體制備

更新時間:2020-05-09點擊次數:1824

技術簡介

細胞信號轉導是細胞功能組學研究的核心內容。而受體配體結合啟動細胞信號活動是許多激活或抑制性信號通路關鍵的起始步驟。通過制備細胞表面信號受體的相關抗體,然后用抗體模擬受體的原配體細胞表面受體結合,從而啟動細胞信號通路,這樣的抗體我們稱之為配體模擬激活性抗體。這其中經典的例子莫過于一些在腫瘤靶向治療中使用的抗體藥物,目前,臨床上至少有11種單克隆抗體藥物被認定為是以受體激活方式發(fā)揮功能的。

目前除了常規(guī)的兔、鼠多抗和鼠單抗雜交瘤細胞制備篩選方案,基于噬菌體展示技術,本公司目前還能夠實現對新的受體激活抗體的發(fā)現,我們有常備的天然抗體庫,也可以根據特定抗原的信息,依托*的原核或真核蛋白表達技術,制備免疫后噬菌體庫,然后針對受體重組胞外區(qū)(ECD)進行特異性抗體篩選。經過噬菌體ELISA初篩的到的單鏈抗體,還可以進一步進行一些基于細胞實驗的功能性篩選。公司目前已分離得到包括TNF受體超家族、CD28、CD40、PD1、CD137等在內的配體模擬型激活性抗體。

服務組合

 

服務項目

(Service Items)

周期(周)

Time(weeks)

免疫庫

immunized   library

天然庫

naive library

雜交瘤制備篩選

Hybridoma   Screening

多肽設計與合成

Peptide design   & synthesis

多肽設計

Peptide design

~2

可選,免費

多肽合成

Peptide   synthesis

  

 

小分子或多肽偶聯

conjugation

  

 

蛋白制備

Proteins   preparation

cDNA合成

cDNA synthesis

6~8

 

  

另議,時間與價格均不包含在以下信息中

載體構建

Vector   construction

 

  

蛋白表達與純化

Protein   expression & purification

 

  

免疫階段

Immunization

免疫動物

Immunized   animals

~8

 

ELISA檢測

Elisa detection

 

細胞融合與篩選

Fusion &   Screening

1.5

  

亞克隆階段

Subcloning

1

  

腹水生產(2只大鼠)

Ascites   production (Injection on 2 mice)

1

  

cDNA制備

cDNA preparation

逆轉錄制備cDNA文庫

prepare cDNA   library by RT-PCR

~1

  

cDNA 文庫質檢

cDNA library QC   check

  

構建Fab抗體庫

Fab library   construction

VH與VL基因獲得

obtained VH   and VL genes

10~15

  

構建初級抗體庫

primary antibody   library construction

  

構建Fab抗體庫

Fab library   construction

  

噬菌體篩選

phage screening

噬菌體顆粒包裝

phage particles   package

10~15

 

磁珠親和篩選

magnetic beads   affinity screening

 

陽性克隆回收基因測序

Recover positive   clones and DNA sequencing

 

抗體表達

Antibody   expression

特異性雙鏈基因合成與Fc基因橋接

synthetic of   target phage gene and Fc gene

~5

 

構建真核表達載體

Eukaryotic   system expression plasmids construction

 

真核表達

Eukaryotic   system expression

 

穩(wěn)轉細胞系構建

Stably   transfected cell line construction

   

純化與檢測

Purification and   detection

標簽純化

Tag affinity   purification

~1

 

親和純化

Affinity   purification

  

特異性親和純化

Antigen specific   affinity purification

 

總周期(月)

Total lead   time(months)

7~9

注:

價格面議;

請慎重考慮周期事宜,以上時間僅為理想條件下短周期;

熱線電話:010-56256916

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